YWHAG基因CDS的克隆及其在梅山与杜洛克猪卵泡发育中的差异表达研究

doi:10.11843/j.issn.0366-6964.2014.03.021

畜牧兽医学报 ›› 2014, Vol. 45 ›› Issue (3): 489-493.doi: 10.11843/j.issn.0366-6964.2014.03.021

YWHAG基因CDS的克隆及其在梅山与杜洛克猪卵泡发育中的差异表达研究

刘丽娟，鲁慧文，杨飞，徐梦思，黄涛^*，李大全

(石河子大学动物科技学院，石河子 832003)

收稿日期:2013-11-02 出版日期:2014-03-23 发布日期:2014-03-23
通讯作者: 黄涛（1978-），男，副教授，主要从事猪分子遗传育种研究，E-mail： taohuang100@sina.com
作者简介:刘丽娟（1988-），女，甘肃静宁人，硕士生，主要从事猪分子遗传育种研究，E-mail：417662445@qq.com
基金资助:
国家自然科学基金项目（30901014；31060295)

CDS Cloning of Porcine YWHAG Gene and It’s mRNA Expression Difference between Meishan and Duroc Swine with Follicle Developing

LIU Li-juan，LU Hui-wen,YANG Fei，XU Meng-si，HUANG Tao^*，LI Da-quan

(College of Animal Science and Technology，Shihezi University,Shihezi 832003, China)

Received:2013-11-02 Online:2014-03-23 Published:2014-03-23

摘要/Abstract

摘要：

本研究旨在探讨YWHAG(Tyrosine 3-monooxygenase/tryptophan 5-monooxygenase activation protein，gamma polypeptide) 基因在猪卵泡发育中的表达规律及其与卵泡发育的关系。从猪卵泡组织中克隆YWHAG基因CDS（Coding region）区全序列，采用半定量RT-PCR和Real-time PCR方法检测YWHAG基因在不同组织中的表达谱信息，并进一步分析了该基因在梅山、杜洛克猪L、M2、M1、S各级别卵泡中的表达变化。结果显示：克隆得到了猪YWHAG基因780 bp编码区全序列，通过与人、小鼠、牛YWHAG基因CDS区BLAST比对，其同源性分别为97.72%、96.68%和98.57%。YWHAG基因在肌肉、肝、脂肪、肺、心、脾、肾、子宫、输卵管、小肠、胃、卵巢、垂体、下丘脑等组织中均有表达，尤其在脂肪、小肠和大脑中表达较高。YWHAG基因在不同直径卵泡中的表达量的趋势均为M1卵泡和L卵泡最高，M2卵泡次之，S卵泡最低，并且在M1卵泡和L卵泡中的表达量显著高于M2卵泡和S卵泡（P<0.05）。YWHAG基因在梅山猪各级别卵泡中的表达量均高于杜洛克猪（P<0.05），并且在梅山猪S和M2卵泡的表达量分别极显著高于杜洛克猪（P＜0.01），而在M1卵泡及L卵泡中的表达量无显著差异；结果提示，YWHAG基因可能参与猪卵泡发育中的凋亡过程，从而引起梅山与杜洛克猪在排卵数方面存在差异。

Abstract:

To detect the expression pattern of YWHAG(Tyrosine 3-monooxygenase/tryptophan 5-monooxygenase activation protein，gamma polypeptide) gene in during porcine follicle development.The CDS(Coding sequence) of YWHAG gene was cloned from porcine follicular tissue.Semi-quantitative RT-PCR was used to analyze the tissue expression profiling of YWHAG genes，Furthermore the expression level of YWHAG in follicles with different diameter(L，M2，M1，S) from Duroc and Meishan were investigated by real-time fluorescence quantitative PCR.The results showed that：the length of CDS of porcine YWHAG was 780 bp，and it’s similarity with that of human,mouse，and cattle was 97.72%，96.68% and 98.57%，respectively.YWHAG mRNA was expressed in all tested tissues(Muscle，fat，heart，liver，spleen，lung，kidney，stomach，small intestine，ovarian，uterine，uterine horn，tubal，pituitary，corpus luteum，brain，the hypothalamus)，and especially high in fat，intestine and brain.Both in Duroc and Meishan swine，the expression of YWHAG mRNA in M1 and L follicles were significantly higher than M2 and S follicles(P<0.05).Moreover，The expression in S and M2 follicles from Meishan were significantly higher than that from Duroc(P<0.01)，while no significant difference in M1 and L follicle.In conclusion，YWHAG gene may be involved in the apoptosis of porcine follicular development process，resulting in differences of ovulation rate in swine.

中图分类号:

S828.2

刘丽娟，鲁慧文，杨飞，徐梦思，黄涛，李大全. YWHAG基因CDS的克隆及其在梅山与杜洛克猪卵泡发育中的差异表达研究[J]. 畜牧兽医学报, 2014, 45(3): 489-493.

LIU Li-juan，LU Hui-wen,YANG Fei，XU Meng-si，HUANG Tao，LI Da-quan. CDS Cloning of Porcine YWHAG Gene and It’s mRNA Expression Difference between Meishan and Duroc Swine with Follicle Developing[J]. ACTA VETERINARIA ET ZOOTECHNICA SINICA, 2014, 45(3): 489-493.

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YWHAG基因CDS的克隆及其在梅山与杜洛克猪卵泡发育中的差异表达研究

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